自動(dòng)對焦顯微鏡的傳統(tǒng)聚焦方法：
 

　　1、圖像遷移方法
 

　　圖像偏移方法采用三角測量測距原理。被攝體發(fā)出的光一起進(jìn)入測距儀的左右兩端，并在接收元件上成像。在兩組之間進(jìn)行信號比較后，獲得合適的聚焦位置
 

　　2、PSD測距方法
 

　　PSD測距系統(tǒng)是另一種基于三角測距原理的主動(dòng)聚焦技術(shù)31。紅外發(fā)光管通過準(zhǔn)直透鏡向目標(biāo)發(fā)射紅外輻射，通過接收透鏡收集物體的漫反射輻射，并匯聚在定向檢測裝置PSD上。通過檢測和計(jì)算PSD輸出電流的比值，得到被測物體的物距，然后通過透鏡控制系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)主動(dòng)聚焦。
 

　　3、對比法
 

　　當(dāng)系統(tǒng)對焦時(shí)，圖像對比度最；當(dāng)系統(tǒng)離焦時(shí)，圖像的對比度降低。離焦量越大，對比度越低。因此，它可以用于一維CCD的對比度檢測，根據(jù)檢測結(jié)果判斷是否聚焦，并聚焦離焦情況。
 

　　自動(dòng)對焦顯微鏡基于數(shù)字圖像處理的主動(dòng)聚焦顯微鏡聚焦方法:
 

　　在數(shù)字成像系統(tǒng)中，可以通過數(shù)字圖像處理實(shí)現(xiàn)主動(dòng)聚焦。數(shù)字圖像處理的聚焦方法可分為兩類：聚焦深度法和離焦深度法331。聚焦深度法
 

　　聚焦深度(DFF)是一種基于搜索過程的聚焦方法。它通過一系列聚焦逐漸精確的圖像來確定從物體點(diǎn)到成像系統(tǒng)的距離。此搜索過程需要不同成像參數(shù)下的多張圖片。使用的圖片越多，對焦精度越高。理想的聚焦點(diǎn)評價(jià)函數(shù)要求是單峰的、單調(diào)的，并在最佳聚焦位置獲得最大值。為了準(zhǔn)確檢測峰值的方位角，減少由于噪聲引起的局部最大值邊緣凸起效應(yīng)所造成的干擾，可以使用斐波那契搜索法和高斯曲線擬合法。